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分光光度計(jì)的組成、原理及使用范圍

2023-07-07 16:13:01

分光光度計(jì)的組成、原理及使用范圍


分光光度計(jì)就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,它是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測用的常規(guī)儀器。常用于核算、蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。在印染方面,我們可以用分光光度計(jì)測量染色時燃料的上染百分率,以及整理在織的衣物上助劑的濃度,還可以用于顏色的測量。同時它還廣泛的應(yīng)用于食品檢測、農(nóng)藥的檢測以及工業(yè)上石油的檢測等,紫外可見光光分度在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用非常廣泛。


分光光度計(jì)的組成、原理及使用范圍


分光光度計(jì)的組成


各種型號的可見分光光度計(jì),就其基本結(jié)構(gòu)來說,都是由五個部分組成的,即光源、單色器、洗手池、檢測器以及信號指示系統(tǒng)。如圖所示:


光源→單色器→吸收池→檢測器→信號顯示系統(tǒng)


分光光度計(jì)的基本原理


基于物質(zhì)對不同波長的光的選擇性吸收,不同的物質(zhì)都有各自的吸收光譜,當(dāng)光經(jīng)色散后的光譜通過某一溶液時,其中某些波長的光就會被溶液吸收。根據(jù)朗伯-比爾定律,當(dāng)一束平行單色光照射到一定濃度的均勻溶液時,光強(qiáng)的減小程度和入射光的強(qiáng)度,溶液的濃度以及所透過溶液的長度成正比,其公式為:T=I/I0 A=LogI0/I=Kbc


其中:T:透色比 I0:入射光強(qiáng) A:吸光度 I:頭色光強(qiáng)度 K:吸收系數(shù),1/mol/com b:液層厚,cm C:溶液的濃度,mol/l


光的吸收定律的使用范圍


光的吸收定律不僅適用于有色溶液,也適用于無色溶液及氣體和固體的非散射均勻體系,不僅適用于可見光的單色光,也適用于紫外和紅外光區(qū)的單色光,但應(yīng)注意,此定律僅適用于單色光和一定范圍的低濃度溶液。溶液濃度過大時,透光性質(zhì)發(fā)生變化,從容使溶液對光的吸收度與溶液濃度不成正比關(guān)系,波長交寬的混合光影響光的互補(bǔ)吸收,也會使測定產(chǎn)生誤差。


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